Nat Neurosci:对小鼠,总括灵长类动物和人类中功能不同的中间神经元进行病毒操作

2022-02-07 01:50:24 来源:
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大规模的转录组深入研究正在迅速概述在特定线粒体类型里面何时何地表示与中枢大脑精神疾病特别的蛋白质。理解和治疗这些疾病的工具将必需抗HIV和随心所欲特定中枢大脑元亚型的工具。因此,在非人类哺乳类和人类里面接触这些人群已变得至关重要。重组腺特别HIV(rAAVs)是在中枢大脑系统里面进行时蛋白质传播的首选工具,对特定的中枢大脑元族裔没有内在的选项性。系统的增强子发现之前通过无需以单线粒体分辨率进行时转录组和各部位表型学深入研究的技术的最新发展而得到较快。但对于增强子选项的搜索空间无论如何很大。为了集里面我们的增强子选项,创作者选项专门深入研究Scn1a的介导态势,Scn1a是在不同中枢大脑元族裔里面表示的蛋白质,其破坏与严重的痉挛病特别。相结合应用于走法走法染色质测序(scATAC-seq)数据的单线粒体测定与周围性特有种的蛋白质组保守性相相结合,创作者在该蛋白质附近参选者了十个候选介导蛋白质组。创作者明确了三种增强子,共同抗HIV表示Scn1a的中枢大脑元族裔的更深。其里面,一种特定的短介导蛋白质组尽可能将HIV表示限制为表示PV的皮质里面间中枢大脑元(PV cIN)。

工具:四名受试者(两名年长者/两名妇女,年龄22-57岁)遵从了一项外科手术,切除了人脑干组织(额叶和海马体)以治疗耐药痉挛。在所有的传染病里面,每个参与者都曾遵从过一次更进一步的手术,放置硬膜下和/或深电极进行时颅内监测,以明确痉挛发作的位置。从海马和额叶得用300μm薄片,在海马薄片里面,HIV的抗HIV是基底膜亚区。在喂养HIV后7~14d对培植的人薄片进行时电生理记录下来。将培植的人薄片转移到记录下来房。对固有膜和发光特性进行时分析。大鼠分别保持一致在17.8–26.1℃和30–70%的整体环境温度和湿度范围内。这些参数被密切监测和控制在啮齿动物聚居房。从麻省理工学院(MIT)的族裔里面获得了一只雌性普通豹子猴(6岁左右)。刚出生(2岁)雄性羚羊(macacamulatta)来自加州大学戴维斯分校的加州国家哺乳类深入研究里面心。在小鼠脑干薄片筒(Zivic Instruments)上进行时冠状薄片,并在冰冷的人工脑干脊髓尿液(ACSF)里面解剖V1皮质。经过处理后,采用采用Nova-Seq S2 100循环试剂盒(Illumina)进行时测序。

结果:在正常或病理发展情况下(包括Dret性疾病)检查接点成熟的早期时序的主要持续性是,在不采用转蛋白质动物的情况下无法重回特定的线粒体类型。即使采用复杂的表型策略,里面年的PV cIN也很难成为靶标。考虑到它们的总质量(它们代表所有抑制性cIN的40%)并且出现得相对较晚。更广泛地说,在本深入研究里面明确的增强子给予了不具备特殊临床意义的中枢大脑元族裔的会面时途径。最微小的是,这些增强剂可以通过蛋白质麻醉药或调节中枢大脑元活性而潜在地应用于减轻Dret性疾病的衰弱症状。创作者证明了均匀分布和胸部注射可应用于有效的HIV传播到人脑干。通过均匀分布注射,可能会优化局灶性痉挛,PFC功能持续性或海马记忆持续性。相比之下,系统性引入HIV可应用于必需下半年打压的情况下,例如,纠正普遍性痉挛发作或精神病和中枢大脑退行性疾病。创作者的深入研究表明,对介导元素的合理核对为治疗环境里面特定线粒体类型的获得用给予了路线图。重要的是,证明了我们的增强子选项工具可推广到其他蛋白质。总体而言,我们发现了四组七个针对不同中枢大脑元族裔和里面枢中枢大脑系统周围不具备独特特异性的增强剂。即使采用了合理的标准(对目标人群的选项性> 90%),我们的工具仍不具备值得注意的成功率(> 20%)。此外,正如移动性保守的蛋白质组所预期的那样,创作者测试的增强子集在包括人类在内的所有特有种里面被证明不具备同等的选项性和持续性。

Vormstein-Schneider, D., Lin, J.D., Pelkey, K.A. et al. Viral manipulation of functionally distinct interneurons in mice, non-human primates and humans. Nat Neurosci (2020).

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